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Phos-tag™ Agarose Phos-tag 琼脂糖

Phos-tag™ Agarose新品速递图wako.jpg

亲和层析纯化磷酸化蛋白



  填入色谱柱中使用。可分离、纯化、浓缩磷酸化蛋白。不使用界面活性剂、还原剂,可得到状态近似生物体内的磷酸化蛋白。



原理

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优点、特色


 缓冲液不含有界面活性剂、还原剂。

 与亲和层析方法类似。

 可在1小时内纯化磷酸化蛋白。

 Phos-tag™ Agarose 捕获结合到 Tyr、Thr、Ser、Asp、His 等氨基酸、糖类、脂类上的无机磷酸根和大二价磷酸根

 可在生理条件下(pH7.5)捕捉蛋白。

 纯化后的产物可用于 Co-IP 实验和其他蛋白活性实验。



案例、应用:


【使用例子:A431 裂解液中的磷酸化蛋白的纯化】


  把Phos-tag™ 填充到柱里,再加上 A431 裂解液。

  SYPRO Ruby 染色(左图)再使用 Anti-p Tyr 抗体进行免疫印迹(右图),检测出结果。

  结果确认磷酸化蛋白浓缩在柱吸附层里。


  M:分子量标记

  Lane 1:未吸附层

  Lane 2:吸附层

  Lane 3:柱清洗层

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